Volgens het toernooi reglement mag een speler worden vervangen bij een serieuze blessure, tot 24 uur voor de eerste wedstrijd van zijn team en na toestemming van het Organiserend Comité.

Brazilië:               Kaká (Orlando City SC, VS) vervangt Douglas Costa (Bayern Munich, Dui)
Panama:              Martín Gómez (San Francisco, PAN) vervangt Ismael Diaz (Porto, POR)
Paraguay:            Iván Piris (Udinese, ITA) vervangt Pablo Aguilar (Club América, MEX), Víctor Ayala (Lanús, ARG) vervangt Néstor Ortigoza (San Lorenzo, ARG)
VS:                      Edgar Castillo (Monterrey, MEX) vervangt Timothy Chandler (Eintracht Frankfurt, Dui)

De Copa America Centenario, het toernooi dat in het teken staat van het honderdjarig bestaan van het toernooi en voetbalfederatie CONMEBOL, gaat op 3 juni (4 juni Nederlandse tijd) van start.

Update 31 mei 2016
Colombia: Yerry Mina (Santa Fe, COL) vervangt Oscar Murillo (Pachuca, MEX)

Update 1 juni
Brazilië: Lucas (Paris Saint-Germain, FRA) vervangt Rafinha (Barcelona, ESP)  en Marcelo Grohe (Gremio, BRA) replaces Ederson (Benfica, POR)
Uruguay: Diego Laxalt (Genoa, ITA) vervangt Cristian Rodriguez (Independiente, ARG)